发布时间：2016-5-19
TaqMan™ advanced miRNA分析采用qPCR技术，可对成熟miRNA进行高敏感性和高特异性定量。通过配合使用TaqMan™ advanced miRNA cDNA合成试剂盒，该解决方案可提供简单的前期工作流程，适用于分析单个样本中的多个miRNA靶标或低RNA水平的血清和血浆样本，并具有出色的灵敏度和特异性。
通用的逆转录 (RT) ——所有TaqMan advanced miRNA分析均使用同一种逆转录步骤
灵敏度——在用于cDNA合成的起始样本中，低至60拷贝数的miRNA都可检测到
特异性——只检测成熟miRNA和区分高度相似的靶标
样本输入量小——可对低至1 pg总RNA或2 µL血浆中的成熟miRNA进行检测和定量
与人体血清、血浆和组织等生物液体样本兼容
卓越的灵敏度
TaqMan advanced miRNA系统可有效处理典型的低RNA量的血清和血浆样本。与传统的预扩增不同，基于连接反应的cDNA合成试剂盒采用的miR-Amp引物能识别添加在每个miRNA 5’和3’端的通用序列，从而避免扩增偏向。作为敏感性和特异性最高的检测方法代表，TaqMan advanced miRNA分析能准确检测1 pg总RNA或2 µL血清/血浆中低至60个拷贝数。
图1：动态范围和灵敏度.
金标准TaqMan特异性
TaqMan advanced miRNA分析可轻松区分仅相差一个碱基的紧密相关的成熟miRNAs。对于同源miRNA 5’端高度保守的“种子区域”，TaqMan advanced miRNA系统表现出卓越的特异性和灵敏度，即使相差一个碱基，也能很好区分。
图2：对紧密相关的miRNA具有特异性。
通用的逆转录
TaqMan advanced miRNA cDNA合成试剂盒具有通用的逆转录步骤，使前期工作流程更简单。在逆转录前，使用3’端加上poly-A尾巴和5’端连接一个接头序列在每个末端延伸miRNA。随后，利用通用的miR-Amp引物和miR-Amp预混液对cDNA进行扩增，均匀地增加每个靶标的cDNA量。
该试剂盒适用于：
工作流程
Step 1样品制备
Step 2逆转录
Step 3miR-Amp通用扩增
Step 4使用TaqMan advanced miRNA分析进行实时定量PCR
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